学术交流炎性皮肤病变的细胞学陈宇

导读

对皮肤病变进行细胞学的检查和判读,可以帮助鉴别细菌性的皮肤感染和正常的细菌菌落,判断是否有真菌或是酵母菌感染的可能,区分可能的感染深度,判定是无菌性的脓疱还是细菌感染性的脓疱,鉴定是否可能是自身免疫性的天疱疮病变,以及帮助区分是否是皮肤的肿瘤性病变,以及可能的肿瘤种类。

判读基本原则

1)为了确保不会遗漏检查所有可能采样采集到的细胞类型,也为了更快的找出可以做出最终判读结果的细胞学判读区域,所有细胞学涂片均是先在低倍物镜(4X,10X,20X)下浏览整张玻片上的所有细胞的类别和组成比例,然后才能切换到高倍物镜(40X,X)下观察细胞的细节结构。

2)如果在玻片中看到一个或两个具有异常特征的细胞,如果这样的异常特征具有病理意义,则在所有的样本中需要看到更多的具有类似异常特征的细胞,如果只有一个或两个这样的细胞,则不足以得到有确定意义的诊断结果。

判读标准

1.细菌

细菌是在皮肤的细胞学样本中最为常见的感染性病原发现,如果使用Romanowsky类别的染色方法进行染色,细菌都会着染为深蓝色的圆形或是杆状结构(分支杆菌外)。在细胞学检查中,我们无法区分具体的细菌种类,也无法鉴别革兰氏阳性和阴性的细菌,但细菌的形态表现可以帮助我们区分球菌(图1)和杆菌(图2),这已经足以帮助我们在不进行药敏实验的前提下选择出更具针对性的抗生素种类。在正常皮肤采样细胞学样本中,对于在一个视野中出现多少个细菌可以判定为是细菌过度生长或是病理性发现的问题尚存争议,但是现在较广为接受的标准是在一个高倍油镜中的球菌或杆菌数量少于2个可能是正常的体表常在菌落,如果发现2个以上的细菌出现则可判定为细菌过度生长或是病理性感染。因为球菌大多是皮肤表面的常在菌,因此如果在采到的体表样本中,看到大量的细胞内或细胞外球菌出现,往往提示动物可能具有免疫力低下的问题(幼犬脓疱病或是库欣氏综合症)。

2.马拉色菌和癣菌感染

对耳道和皮肤进行棉棒和压片细胞学检查,可能是检出马拉色菌最有效的方法。虽然厚皮马拉色菌是皮肤的常在菌落的一部分,临床上对于何等数量的马拉色菌可以视为马拉色菌性皮炎尚有一定的争议,但是现在一般认为,如果在一个高倍镜视野下(X物镜)观察到的马拉色菌数量在一个以上,可以判读为马拉色菌性皮炎或耳炎。马拉色菌在常用的Romanowsky染色下,其典型形态为花生型(出芽生殖阶段)(图3),但是也有可能表现为球形或是椭圆形(未出芽生殖阶段)。

临床上造成动物感染的癣菌主要为小孢子菌和毛癣菌。一般通过拔毛检查或是粘性胶带黏贴染色后检出这些癣菌的菌丝体和胞子。但是在部分病例中,对病变部位的渗出物进行细胞学染色检查也能发现菌的菌丝体和胞子的存在。在细胞内和细胞外的菌丝体和胞子在使用Romanowsky类别的染色方法染色后,会表现为具有一圈透明晕圈结构的中度至深度着染的圆形或是椭圆形结构(图4)。

3.炎症表现

对皮肤的炎症病变进行细胞学检查,能够通过对炎性细胞类型的鉴别,判定出炎症表现的类型,从而对潜在的可能病因有更进一步的提示。表2列出了各种常见的皮肤采样所见到的炎症细胞和相关微生物所具有的提示意义:

1)化脓性炎症

这种类型的炎症是指在采到的样本中,超过80-85%的细胞都是嗜中性粒细胞。这种类型可以进一步细分为伴有退行性变化的嗜中性粒细胞类型和不伴有退行性变化的嗜中性粒细胞类型。

伴有退行性变化的嗜中性粒细胞会表现出核溶解的现象,既表现出细胞核肿胀,细胞核的着染程度降低的表现(图5)。

这样的表现提示细胞是在有毒素存在的环境中出现急性的死亡。嗜中性粒细胞出现这种变化多见于细菌感染的病例之中。而与此相反的是非退行性变化的嗜中性粒细胞,这种细胞的细胞结构和形态就如同血液当中的正常嗜中性粒细胞(图6),在样本中主要出现这种细胞提示炎性反应的部位没有毒性因素涉及在内,一般多见于免疫介导性的病变,肿瘤性病变,或是由于尿液或胆汁刺激所导致的炎症部位。

2)巨噬细胞性炎症

这种类型的炎症是指在采到的样本中,超过70%以上的细胞为巨噬细胞。这种类型的细胞组成的病变出现一般提示慢性炎症的存在,多见于异物反应或是分支杆菌的感染(图7)。

3)脓性肉芽肿性炎症

这种类型的炎症是指在采到的样本中大部分细胞为嗜中性粒细胞和巨噬细胞的混合组成,其中巨噬细胞占总细胞比例的20-50%的比例(图8),在慢性的病例中,还可能发现巨噬细胞融合后形成的多核巨细胞(图9),此外还可能具有少量的淋巴细胞和浆细胞。这种类型的炎症通常与异物反应,真菌感染,分支杆菌感染,舔舐性肉芽肿,脂膜炎和其他慢性炎症。

4)嗜酸性粒细胞性炎症

这种类型的炎症是指在采到的样本中,在所有的炎性细胞之中,嗜酸性粒细胞所占到的比例超过10%(图10)。一般会在嗜酸性肉芽肿,过敏性皮肤病,寄生虫移行,肥大细胞瘤,真菌感染等病变有关。但是一定要注意,如果有使用糖皮质激素,则可能导致嗜酸性粒细胞的数量明显下降甚至完全消失。

5)淋巴细胞性或是浆细胞性炎症

这种类型的炎症是指在采到的样本中,在所有的炎性细胞之中,淋巴细胞或是浆细胞所占到的比例超过50%(图11)。这种类型的炎症通常与过敏性或是免疫性的疾病,早期的病毒感染和慢性炎症有关。

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