草茎点霉引起野生高体鰤自发性肉芽肿性气囊

草茎点霉(PhomaherbarumWestend)是一种腐生真菌,通常被认为是一种植物病原菌,分布广泛,可以从植物残渣,无机物,水源,人和动物中分离到草茎点霉。

据报道,在鱼类中,水生杆状菌是兼性病原体,引起慢性和致死性内脏霉菌病。鱼嗜血杆菌的感染表现为鱼嗜睡和不规则游泳,例如随着感染的进行,它们在侧面或垂直位置游泳,并在侧面或底部休息。随着感染的进行而发生物理变化,包括肿胀和出血的通气孔,区域肌肉软化,沿侧面和腹侧表面出现瘀斑和眼球突出症。对内脏器官的评估显示,鱼鳔中存在白色干酪样坏死性肿块和充血壁。鱼鳔与胃肠道之间有粘连,淡黄色液体引起胃膨胀。组织病理学检查显示,在鱼鳔腔内有大量的隔膜菌丝,广泛的炎性浸润,以及从器官壁变性坏死和脱落的细胞。鱼鳔成为被草茎点霉感染最严重的器官。

鱼类中的草茎点霉的确切入口仍不清楚。经常有人提出的理论是,从饲料或地表水中摄入的分生孢子可能会通过气动管道从消化道流向鱼鳔。但是,提出的理论是基于仅在维持气管-有气孔的物种中发生的自发性体育标本的报道。

高体鰤是一种海洋鱼类,通常在近海的峡谷,和大西洋及印度太平洋的垂降岩石旁出现。作为机会性捕食者,它会捕食底栖或上层鱼类,接近地表或接近底部。不仅在商业和休闲渔业中很受欢迎,最近也将高体鰤引入水产多样化养殖。因此,关于影响该物种的病理学知识非常重要,可以避免疾病的传播、鱼类生产的主要瓶颈以及经济损失。

据我们所知,我们在本文中首次描述了由野生高体鰤中的草茎点霉引起的自发性肉芽肿性气囊炎。在加那利群岛西北兰萨罗特岛的拉桑塔,当地渔民捕获了一只成年雌性高体鰤,体重分别为27公斤,体长厘米和全长厘米。

根据Meyers()有鳍鱼类标准进行尸检,并收集组织样本进行组织病理学分析。将鱼鳔,前肾和后肾,肝,胃,肠,心脏,鳃和性腺的组织样品固定在10%磷酸盐缓冲的福尔马林溶液中,包埋在石蜡中,切成四微米的切片,苏木精和伊红(HE)染色。

外部检查未发现异常或病变。内脏的感染发现仅限于鱼鳔。它呈现出形态的完全丧失,壁的普遍增厚和不透明,尺寸显着增大(36mm×16mm),并减少至闭塞的管腔。多个通常合并的,半透明的,变白的,可变大小的(20–80mm)充满液体的囊性病变取代了正常结构(图1a,b)。在囊性病变中还观察到不规则的棕褐色至深棕色坚硬和凸起的结节,范围从7至20mm(图1b)。囊性结节和坚韧结节均被很好地划定,并被光滑,较厚的纤维结缔组织隔开。观察到多灶性出血灶,特别是在器官的尾侧。

图1(a)是带有多个囊性病变和出血灶(Cr-颅骨,Ca-尾骨,V-腹侧,D-背侧)的鱼鳔的侧视图。(b)鱼鳔的内部。许多囊性结构(箭头)与多个可变大小的棕褐色混合成深棕色固体结节(*)

鱼鳔的组织学检查显示有多个可变大小的囊肿,排列有一层至多十二层厚的衰减到立方上皮细胞,并被透明间隙扩大或充满了嗜酸性的均质蛋白液(图2a)。剩余的组织被许多坏死性组织肉芽肿所取代,这些肉芽肿具有坏死组织的核心,通常是色素沉着和矿化的,周围有上皮样巨噬细胞,异物型多核巨细胞和淋巴细胞。肉芽肿和囊性病变被血管化的疏松结缔组织的明显可变的较厚的带分隔开,该组织较稀疏并分散了少量的淋巴细胞和巨噬细胞聚集体(图2b)。通常,在肉芽肿内,观察到大量丝状不规则分支的菌丝菌丝,宽度为3–6μm的罕见球根肿胀(图2c),并以GMS(图2d)和PAS突出显示。

图2(a)鱼鳔。大小不等的囊肿,被厚厚的血管化疏松结缔组织(H&E)隔开。(b)鱼鳔。多发性大小不等的肉芽肿,以坏死组织为核心(*),周围被上皮样巨噬细胞,异物型多核巨细胞和淋巴细胞所包裹,并混有大小不等的囊肿,并被厚厚的带血管的疏松结缔组织和小聚集体隔开淋巴细胞和巨噬细胞(H&E)。(c)肉芽肿(H&E)中被多核巨细胞(*)包围的分隔菌丝(箭头)。(d)肉芽肿(GMS)内的分支分隔菌丝

来自其他器官的组织样本没有发现真菌感染的存在,没有观察到其他病理变化,除了在胃腔中轻度感染了线虫(Anisakidae)外,没有相关病变。真菌DNA的检测和测序可以在本研究的鱼鳔样品中鉴定出作为草茎点霉的物种。草茎点霉是一种腐生真菌,分布普遍。据报道,它在鱼类中起着兼性病原体的作用,引起慢性进行性和致死性内脏真菌病,鱼鳔是受感染最严重的器官。

鱼鳔是一种静水器官,其主要功能是调节浮力。目前公认两种主要类型的鱼鳔。在有气孔的物种(例如鲑科)中,鱼鳔通过气动导管连接到食道。气动管道通过将空气吞入表面并将其向下通过肠道,有利于气体进入鱼鳔。相比之下,在植物学家中,在胚胎发育过程中,鱼鳔与消化道之间的联系不再存在,并且鱼鳔的填充和排空机制是通过血流扩散来实现的。

先前的报道表明,在淡水中,由草茎点霉对鱼内脏真菌病的报道仅限于鲑鱼科孵化场饲养的鱼。由于鱼鳔是受影响最严重的器官,因此可以假设感染可能是由于真菌在摄入食物或碎屑后从消化道通过气动导管进入鱼鳔而引起的。由于没有气管,因此在闭鳔物种中,该理论将不适用。在游泳阶段启用的吸入传播是另一种假定的感染途径。有人提出,在气体交换过程中,可将草茎点霉沉积在水面的植物中的雾化分生孢子吸入,并传递到鱼鳔中。同样,气管的缺失也推翻了生理学家的这一理论。但是,在气体交换过程中可能会发生传输。当溶解在周围水中的氧气通过鳃中传出的小动脉进入血流时,它会穿过背主动脉,到达鱼鳔。此外,有报道称,在异种外生细菌引起的气囊炎病例中,鱼鳔感染可能是由于未确定的血管侵犯所致。主要部位,通过气管毛细血管网的血生性播种。高体鰤通常会捕食靠近水体表层的食物,在该表层上,带有草茎点霉的沉积物的雾化分生孢子,将使其特别容易受到这种途径的感染。但是,由于在本例中未取样背主动脉,因此我们无法在此进入门上做进一步的假设。

在实验性感染草茎点霉的过程中,总的来说,最高死亡率是通过腹膜内和皮下注射获得的,而在较小的程度上,是通过口服传播的。但是,由于研究在剂量,暴露时间,水条件和环境方面存在差异,因此结果尚不确定。

尽管真菌是无处不在的,但很少有人报道鱼中自发败血性杆状菌自发感染。这种据称是低发病率的病支持了这样一种观点,那就是,草茎点霉的致病作用在很大程度上取决于宿主的免疫状态。有研究人员在实验研究中将草茎点霉传播给奇努克鲑鱼。报道说,在最佳环境条件下,生存率往往更高。众所周知,物种,遗传背景,年龄,生殖状况和营养状况等内在因素可能会对免疫系统产生负面影响。同样,外部因素,如季节和温度,处理,密度和污染,也可能对免疫系统的活动产生负面影响。

在先前报道的草茎点霉疟原虫感染中,鱼苗和小鱼是受影响最大的。这些观察结果与幼鱼天生就更易患疾病有关,因为它们尚未获得天然抗性。同样,作为体温热动物,温度会显着影响其新陈代谢,尤其是在免疫方面。据报道,水温降低会抑制免疫反应。在春季和秋季,水温的变化更加突然时,来自温带和寒冷气候的鱼类特别容易感染传染病。但是,在受控环境下,上述自发感染的病例仍发生在孵化场饲养的物种中。

本报告涉及活着的成年野生高体鰤。在野生环境中,可能导致感染风险增加的压力源数量众多。可能有几种因素促使感染。众所周知,生殖状态会调节免疫力,特别是在产卵季节,成年鱼的自然抵抗力会降低,因为它们的能量被转移到生殖活动中。潜在或机会性病原体也可能引起免疫抑制,从而导致继发感染。在我们的案例中,观察到的轻度胃线虫感染可能在抑制免疫系统中发挥了作用,从而促使了由草茎点霉疟原虫感染。另外,水温突然变化可能会对免疫系统产生负面影响。要指出的是,草茎点霉的最佳生长温度在20oC至25oC之间,并且从6月至9月,东部大西洋东部的温度通常徘徊在20oC和23oC之间。然而,重要的是要记住,草茎点霉的特征是引起慢性进行性疾病,并且不可能确定这些应激源在感染开始时所起的明确作用。

总而言之,以前的报道表明,草茎点霉自发性内脏真菌病仅限通鳔结构的淡水养殖鱼类。据了解,这是首次报道了草茎点霉导致的肉芽肿性气管炎发生于野生高体鰤这样的闭鳔海洋鱼类中。

这一个发现主要在于过去几年来在水产养殖中对高体鰤的引入。由于草茎点霉与孵化场的大量损失有关,因此,有必要更好地识别这种可能导致鱼类生产瓶颈的潜在疾病,才能够预防或治疗它们并避免经济损失。

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