「我在实验室走过最远的路,就是WB的弯路……」
从开始的组织研磨,到样品制备、蛋白定量……几乎所有的坑都能踩上一遍。
熟悉流程后进一步实验,依旧面临了不少问题:比如最近,我们要在同一张膜上研究多个蛋白的表达,用什么实验方法就把我难住了。
第一时间想的是裁膜,但师兄提醒:现在越来越多的期刊要求提供未剪切的Blot图。
StrippingReprobing?师兄说:这种办法因可能存在过度Stripping或Stripping不足,从而导致准确性低和重复性低。
那怎么办?师兄让我尝试一下多色荧光WesternBlot。
但我知道多色荧光WesternBlot实验有局限呀,受制于仪器、荧光抗体,通常只能同时检测2~3个蛋白条带,根本不够用……
现在不用纠结啦,为了扩展多色荧光WesternBlot的应用范围,Bio-Rad近期在其全能型成像系统ChemiDocMP上开发了5色荧光实验方案,除去内参蛋白后,最多还可以实现4个目的蛋白的同时检测。
5色荧光实验方案,扫描文末